【摘要】 目的探讨微小RNA（miRNA）-335对缺氧复氧（H/R）诱导下大鼠心肌微血管内皮细胞（CMEC）凋亡的作用及其机制。方法建立大鼠CMEC H/R模型。采用体外合成的大鼠miR-335的模拟物和抑制剂,用脂质体转染培养的大鼠CMEC 48h后,H/R处理细胞。实验分为4组：对照组（CTL组）、H/R组、H/R加miR-335模拟物组（mimic组）、H/R加miR-335抑制剂组（inhibitor组）。采用超氧化物阴离子荧光探针法观察细胞内超氧阴离子（O2·-）的变化水平、JC-1试剂盒检测细胞线粒体膜电位的变化,流式细胞仪检测各组细胞凋亡。结果在H/R处理后,H/R组超氧化物歧化酶（SOD2）蛋白表达明显下调,而miR-335的表达明显上调。与CTL组比较,H/R组、mimic组、inhibitor组O2·-水平[（35.23±3.21）%、（46.71±2.58）%、（15.9±2.13）%vs（4.46±0.98）%,P〈0.01]、细胞凋亡率[（30.46±1.63）%、（40.21±1.73）%、（17.83±1.45）%vs（2.14±0.33）%,P〈0.01]明显上升,橙光与绿光比值[（0.47±0.03）、（0.28±0.05）、（0.66±0.03）vs（1.0±0.07）,P〈0.01]显著下降。结论miR-335能够增加氧化应激条件下心肌微血管内皮细胞的凋亡,miR-335通过调控SOD2蛋白的表达,在缺氧复氧介导的线粒体凋亡途径中扮演了关键性的作用。