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报告基因成像评价Ghrelin对骨髓间充质干细胞的缺氧保护作用

【作者】 范伟伟 [1] ; 王慎旭 [2] ; 张荣庆 [2] ; 李聪叶 [2] ; 刘俊延 [3] ; 胡振华 [3] ; 王福 [3] ; 王海昌 [2] ; 曹丰 [2]

【关键词】 胃促生长素 基因 报告 萤

摘要】目的通过报告基因成像评价Ghrelin对骨髓间充质干细胞(Mscs)的缺氧保护作用。方法采用密度梯度离心法分离稳定表达萤火虫荧光素酶(Fluc)的MSCs,随机分为对照组、缺氧复氧组和10^-9、10^-8、10^-7Ghrelin组,后3组分别加入10^-9、10^-8、10^-7mol/L Ghrelin培养。运用Fluc报告基因成像、MTT法对MSCs的生物学活性进行定量评价,Westernblot和EI,IsA法检测MSCs的作用机制。结果MSCs稳定表达报告基因Fluc,其光学信号强度与细胞数量呈正相关(r^2=0.96)。缺氧复氧组MSCs生存活力较对照组显著下降;与缺氧复氧组比较,10^-8、10^-7Ghrelin组MSCs生存率和VEGF分泌水平明显升高,10^-8Ghrelin组磷酸化Akt表达明显升高(P〈0.05)。结论Ghrelin能够显著提高缺氧复氧后MSCs的存活能力,可能是MSCs的保护性因素。

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