报告基因成像评价Ghrelin对骨髓间充质干细胞的缺氧保护作用
【作者】
范伟伟
[1] ;
王慎旭
[2] ;
张荣庆
[2] ;
李聪叶
[2] ;
刘俊延
[3] ;
胡振华
[3] ;
王福
[3] ;
王海昌
[2] ;
曹丰
[2]
【关键词】
胃促生长素
基因
报告
萤
【摘要】目的通过报告基因成像评价Ghrelin对骨髓间充质干细胞(Mscs)的缺氧保护作用。方法采用密度梯度离心法分离稳定表达萤火虫荧光素酶(Fluc)的MSCs,随机分为对照组、缺氧复氧组和10^-9、10^-8、10^-7Ghrelin组,后3组分别加入10^-9、10^-8、10^-7mol/L Ghrelin培养。运用Fluc报告基因成像、MTT法对MSCs的生物学活性进行定量评价,Westernblot和EI,IsA法检测MSCs的作用机制。结果MSCs稳定表达报告基因Fluc,其光学信号强度与细胞数量呈正相关(r^2=0.96)。缺氧复氧组MSCs生存活力较对照组显著下降;与缺氧复氧组比较,10^-8、10^-7Ghrelin组MSCs生存率和VEGF分泌水平明显升高,10^-8Ghrelin组磷酸化Akt表达明显升高(P〈0.05)。结论Ghrelin能够显著提高缺氧复氧后MSCs的存活能力,可能是MSCs的保护性因素。
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