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过表达肌浆网钙三磷酸腺苷酶抑制缺氧诱导心肌细胞凋亡的

【作者】 董建军 [1] ; 鲁晓春 [1] ; 刘秀华 [1] ; 张振英 [1] ; 李小鹰 [1]

【关键词】 肌浆网 腺苷三磷酸酶 缺氧

摘要】 目的研究过表达肌浆网钙ATP酶2a(SERCA2a)能否提高心肌细胞对缺氧的耐受性,评价其对心肌细胞凋亡的影响。方法体外培养的SD乳鼠心肌细胞随机分为对照组、缺氧组、过表达SERCA2a组和SERCA2a+缺氧组,以携带SERCA2a基因的重组腺病毒转染心肌细胞48h后对其进行缺氧处理。Westernblot法检测细胞质内SERCA2a蛋白及Caspase3表达的变化;膜联蛋白V/碘化丙啶双染色法及流式细胞术检测心肌细胞凋亡率;激光共聚焦显微镜检测细胞质内Ca^2+浓度变化。结果与对照组比较,缺氧组SERCA2a蛋白表达水平显著降低,过表达SERCA2a组蛋白含量升高2.5倍(P〈0.05),缺氧组Caspase-3蛋白表达升高53.1%,过表达SERCA2a后给予缺氧处理,Caspase-3蛋白表达降低39.7%(P〈0.05)。与对照组比较,缺氧组心肌细胞凋亡率显著升高,与缺氧组比较,SERCA2a+缺氧组细胞凋亡率显著下降(P〈0.05)。与对照组比较,缺氧组细胞质内Ca抖荧光强度显著升高;与缺氧组比较,SERCA2a+缺氧组细胞质内Ca^2+荧光强度显著降低(P〈0.05)。结论过表达SERCA2a可减轻细胞内Ca^2+超载和抑制Caspase-3激活,进而减少缺氧诱导的心肌细胞凋亡。

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